RNA質(zhì)量中260:230:分光光度計測量RNA溶液的濃度。
260nm是核酸分子吸收峰的波長,而230nm的波長處如果出現(xiàn)吸收,則最有可能由苯酚等化學基團引起。
1、A260nm:是核酸最高吸收峰的吸收波長,最佳測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內(nèi);如果吸光度小于0.05,檢查是否存在操作因素(如移液不準確,樣品內(nèi)有懸浮物等)影響。
2、A230nm:是碳水化合物最高吸收峰的吸收波長,比值可進行核酸樣品純度評估。
RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0表明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。
擴展資料
RNA樣品的質(zhì)量檢驗一般分為總量,純度與完整性三大項。
總量:微量分光光度計測260nm吸收值計算。
純度:微量分光光度計測260nm/230nm吸收值的比值,用于評估有機溶劑殘留;260nm/280nm吸收值的比值,用于評估蛋白質(zhì)污染比例。
完整性:以AgilentBioanalyzer進行毛細管電泳(capillaryelectrophoresis),并以軟件的RIN(RNAIntegrityNumber)分數(shù)評估,10為RNA完整性最好,0為最差。